Simoa（Single-molecule Array）技术是由美国Quanterix公司研发生产的一款超高灵敏度单分子蛋白质检测技术，其灵敏度为ELISA技术的1000倍以上，检测下限达到fg/mL，实现了超低丰度蛋白的有效检测和定量，为低丰度炎症因子的实时监控提供了技术支撑。

Simoa技术原理‍‍‍‍‍‍‍

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        Simoa 技术是将约250,000个捕获抗体包被在2.7 μm的小磁珠（10种荧光标记）上，检测时加入生物素标记的检测抗体及亲和素偶联的酶和底物，通过一层油将单个磁珠封闭在4.5 μm的反应孔（Well）中进行反应（避免信号扩散和交叉反应）。每238,000个Well组成一张芯片（Array），每24个Array再组成一张光盘（Disc），Disc数据采集使用CCD摄像头捕获这些小孔中超过阈值的检测信号，标记为“on well”和“off well”。通过计算“on well”在Array中的比例，依据泊松分布理论，计算出目的蛋白的浓度，实现数字化定量，其精确度远超ELISA的模拟定量。由于磁珠经过多重荧光标记，通过计数不同颜色荧光磁珠的“on well”数量，即可同步获得多个检测指标的浓度定量值。

        Simoa技术的关键原理在于：每个Well的反应体系仅为50飞升，比ELISA反应孔小20亿倍，因此，Simoa相比传统技术，不仅提高酶底物的反应效率，且指数级降低了荧光信号的扩散和背景信号的干扰，从而提高了低丰度蛋白的检测灵敏度，实现了单分子检测的可能。

爆款产品

超灵敏细胞因子多重检测

       在细胞因子检测常规研究中，IFN γ、IL-6、IL-10、IL-12P70、IL-17A、TNF α等超低丰度指标普通检测手段往往无法获得检测值，对于疾病初期这些细胞因子的连续性数据的观察提出了挑战。

超灵敏细胞因子多重检测试剂盒专为常见的超低丰度细胞因子检测而开发，每次实验可实现多个指标的检测，在节省样本的同时，保持了超高灵敏度和数据稳定性。Run间、Run内；仪器间、Lot号间的CV基本小于10%。线性稀释和回收率实验，上下浮动也能小于20% 。

超灵敏单个因子检测

Simoa试剂盒还可以实现单个细胞因子的检测，多元化地满足不同的研究需求。在常见和稀有细胞因子检测方面Simoa试剂盒均有广泛覆盖，具体如下表：

‍‍‍Simoa技术优势‍

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•  高灵敏度：比传统ELISA灵敏度提高1000倍
  

•  高精确度：批间变异系数（CVs）低于10%

•  高线性范围：检测动态范围跨越4个数量级

•  高效性：一次反应可检测24例样品中10种蛋白质

•  独特性：拥有多种其它品牌不具备的关键指标

•  灵活性：可通过增加样品稀释倍数解决体积限制

        David Yeung ^[1]等研究人员对比了大多数超敏蛋白质检测技术对于IL-2、IL-6、IL-17A、TNF-α等低丰度炎症因子的检测情况，发现Sioma技术无论在灵敏度还是在数据重现性上，相比其他技术均具有显著优势。因此，Simoa技术适合用于低丰度炎症因子检测。

                                 Sima技术与其他超敏检测技术的横向比较

FEAD: Frequency of endogenous analyte detection

‍检测指标‍

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        华盈生物全力打造抗体芯片、Luminex和Simoa技术的联合检测平台，全面解决炎症因子的筛选与低丰度检出问题，为临床标志物研究、药物评价、疾病机理等生物医学研究提供系统性解决方案。

相关文献‍‍‍‍‍‍‍

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2. Fleischmann RM, et al. A Phase 2 Trial of Lutikizumab, an Anti-Interleukin 1α/β Dual Variable Domain Immunoglobulin, in Knee Osteoarthritis Patients With Synovitis. Arthritis Rheumatol. 2019 Jan 17.  9.002

3. Saxena A, et al. Ultrasensitive Quantification of Cytokine Proteins in Single Lymphocytes From Human Blood Following ex-vivo Stimulation. Front Immunol. 2018 Oct 23; 9: 2462.  4.716

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